Prova di 3

Precisione osservata con l'uso di macchie di sangue essiccato prelevate per lo screening neonatale

di Patricia Inácio, PhD | 30 agosto 2023

Misurare i livelli di 3-O-metildopa (3-OMD) nelle macchie di sangue essiccato utilizzate nei programmi di screening neonatale potrebbe aiutare a diagnosticare il deficit di L-aminoacido decarbossilasi aromatica (AADC) nelle prime fasi della vita, suggerisce uno studio condotto a Taiwan.

I risultati di 157.371 neonati hanno mostrato che sei degli otto bambini con livelli di 3-OMD superiori al normale presentavano mutazioni patogenetiche e hanno sviluppato sintomi di deficit di AADC.

Il test “potrebbe essere facilmente integrato nei programmi di screening neonatale esistenti e facilitare la futura applicazione per la diagnosi precoce e un trattamento efficace”, hanno scritto i ricercatori.

Lo studio, “Determinazione semplificata di 3-O-metildopa in macchie di sangue essiccato: screening prospettico per deficit di decarbossilasi aromatica dell’l-aminoacido”, è stato pubblicato sulla rivista Molecular Genetics and Metabolism.

Tipicamente, la carenza di AADC è causata da mutazioni in entrambe le copie del gene DDC, che fornisce le informazioni per produrre la decarbossilasi dell'aminoacido aromatico, un enzima noto anche come AADC.

Questo enzima è necessario per produrre due importanti neurotrasmettitori: la dopamina e la serotonina. I neurotrasmettitori sono sostanze chimiche utilizzate dalle cellule nervose per comunicare tra loro.

Le mutazioni fanno sì che l'enzima sia difettoso o venga prodotto a livelli inferiori a quelli necessari. Ciò porta a sintomi che si manifestano più comunemente nei primi sei mesi di vita, tra cui basso tono muscolare e mancato raggiungimento delle tappe fondamentali dello sviluppo.

Tuttavia, una diagnosi di deficit di AADC “spesso ritardata dalla scarsa consapevolezza della malattia e dalla [mancanza di] esami di laboratorio specifici”, hanno scritto i ricercatori.

Diventa sempre più importante anche l’uso diffuso di un metodo relativamente semplice e rapido per diagnosticare questa malattia, con un primo trattamento modificante la malattia, la terapia genica Upstaza (eladocagene exuparvovec), approvata nell’Unione Europea e nel Regno Unito

Gli studi hanno dimostrato che la misurazione dei livelli di 3-OMD nelle macchie di sangue essiccato potrebbe aiutare a diagnosticare il deficit di AADC. Senza un enzima AADC funzionante, i precursori della dopamina come la L-dopa si accumulano all'interno delle cellule e vengono scomposti in 3-OMD, quindi è presente ad alti livelli anche nei pazienti con deficit di AADC.

Ricercatori di Taiwan avevano già dimostrato che le misure 3-OMD potrebbero essere integrate nei programmi di screening neonatale, utilizzando una singola macchia di sangue essiccato raccolta entro pochi giorni dalla nascita.

I livelli di 3-OMD hanno aiutato a identificare quattro neonati con deficit di AADC su un totale di 127.987 neonati, e questi bambini hanno potuto partecipare a studi di terapia genica, “con conseguente significativo miglioramento motorio e cognitivo”, ha scritto il team.

Questo stesso team ha ora descritto un metodo rapido e altamente specifico per lo screening del deficit di AADC come parte dello screening neonatale di routine per errori metabolici congeniti a Taiwan.

I campioni di sangue essiccato raccolti 48 ore dopo la nascita sono stati prima analizzati per 3-OMD e altri metaboliti utilizzando il kit NeoBase 2, che utilizza una tecnica chiamata analisi di flusso-iniezione-spettrometria di massa tandem per identificare e quantificare le molecole.

L'uso di un kit riduce i tempi e la preparazione dei campioni e consente ai ricercatori di eseguire centinaia di test al giorno.

I campioni con livelli di 3-OMD al di fuori dell'intervallo normale sono stati analizzati nuovamente con una tecnica più specifica, chiamata cromatografia liquida ad alte prestazioni-spettrometria di massa tandem.

Se il livello di 3-OMD risultava nuovamente superiore al normale (500 nanogrammi per millilitro, o ng/ml), il neonato veniva indirizzato all'ospedale dei ricercatori per un esame fisico e test genetici per confermare il deficit di AADC.

Tra febbraio 2020 e dicembre 2022, con il kit NeoBase 2 sono state analizzate macchie di sangue essiccato di 157.371 neonati. Un totale di 114 campioni (0,1%) sono stati analizzati con la tecnica più specifica e otto di essi hanno mostrato livelli anomali di 3-OMD, compresi tra 839 e 5.170 ng/mL.